第456章 不气馁（1/2）

沈慕颜的话总是能在看似无望的境地里，指出一点可行的方向。

老吴沉默了一下，点头：“也行。死马当活马医。小孙，去准备点氢氧化钠和盐酸，浓度按……”他看向沈慕颜。

沈慕颜立刻接上：“先用0.5M的NaOH处理，再用去离子水洗至中性，接着用0.5M的HCl平衡，最后再用平衡缓冲液充分平衡。我们一步步来，随时检测pH和电导。”

小孙听得有些咋舌，但还是麻利地应了声好，转身去准备试剂了。

老吴则开始清洗一些可能用到的玻璃层析柱和管路。

准备工作琐碎而耗时。

配制溶液，调试pH计，清洗、预处理那包古董DEAE-纤维素……每一步都需要耐心和细致。

沈慕颜和老吴分工合作，一个负责调配和检测，一个负责装填和冲洗，小孙则负责传递物品和记录初步参数。

过程中难免遇到问题。pH计读数不稳，需要反复校准。

预处理后的纤维素依然有些板结，流速很不理想。

连接管路的硅胶管老化，差点漏液……每当小孙有些焦躁或老吴又开始皱眉摇头时，沈慕颜总能及时发现问题所在，提出调整方案，语气始终平稳。

“孙同志，别急，pH计用之前多摇一摇，电极用标准缓冲液多浸泡一会儿。”

“吴老师，流速慢可能是因为装填太实了，我们卸掉一点，重新用悬浮液慢慢装，边装边轻轻敲击柱壁试试。”

“这根硅胶管弹性不行了，孙同志，去器材室问问有没有稍微新点的，实在不行，我们暂时用这段短的，多接几个玻璃管过渡。”

沈慕颜的冷静和专业感染了另外两人。老吴紧绷的脸色渐渐缓和，甚至在小孙又一次手忙脚乱差点打翻烧杯时，破天荒地没有斥责，只是叹了口气，说了句慢点，看着点。

小孙也在一次次实际操作中，慢慢沉下心来。

旁边连着用各种长短不一的玻璃管和硅胶管拼凑起来的管路，寒酸。

“行了，柱子算是装好了。”老吴擦了擦额头的汗，直起有些酸痛的腰：“接下来，就是把昨天分离的那点血浆上清液上样了。沈医生，你确定这柱子能挂得住凝血因子VIII？别到时候蛋白全流穿了，白忙活一场。”

沈慕颜看着那根简陋的层析柱，目光沉静：“理论上，在合适的pH和离子强度下，凝血因子VIII应该能结合到DEAE上。但我们用的填料活性未知，血浆样本也经过了几步粗处理，杂质很多。

这次实验，主要目的是验证这套我们东拼西凑的层析系统能不能跑起来，观察蛋白的洗脱行为，收集各个馏分，然后测试有没有凝血活性。哪怕只得到一丁点儿有活性的部分，就是成功。”

她总是把目标定得实际而清晰，不盲目乐观，也不轻易气馁。

“开始吧。”老吴戴上手套，示意小孙准备好记录本和笔。

沈慕颜深吸一口气，拿起那个装着经过初步离心和冷沉淀处理的血浆上清液的小烧杯，小心地、缓慢地，将其加注到层析柱顶端的样品池中。

淡黄色、略显浑浊的液体，慢慢渗入白色的填料层。

所有人的目光都紧紧盯着柱子下端出口。

一秒，两秒……淡黄色的液体开始一滴滴地，极其缓慢地，滴入第一个试管中。

“流速太慢了！”小孙忍不住低呼。

“填料阻力大，正常。”沈慕颜语气平稳：“记下开始时间，吴老师，我们准备切换平衡缓冲液，开始洗脱。”

老吴点点头，拿起另一个装着预先配好，低离子强度缓冲液的瓶子，准备在样品液全部进入填料后接上。

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